研究表明益华乳酸菌素具有保护肠道黏膜，有效地、选择性的抑杀机体内致病性大肠杆菌、沙门氏菌为代表的革兰氏阴性菌，以及金黄色葡萄球菌为代表革兰氏阳性致病菌，以及改善应激等功能。同时可增强消化能力。但在牛奶上缺乏相关试验验证。本试验希望通过在奶牛日粮中添加益华乳酸菌素，研究其对奶牛采食量、产奶量、乳成分、血液代谢等指标的影响，为益华乳酸菌素对奶牛生产性能的影响提供一定的理论数据。

1材料与方法

1.1试验动物及试验设计

在石家庄灵寿某奶牛场选取108头健康的中国荷斯坦泌乳奶牛进行试验。试验采用随机对照试验设计，即根据泌乳天数（102.8±61.35天）、产奶量（34.48±3.79天）、胎次（1.2±0.41胎）相近的原则，将108头泌乳牛随机分成三组，每组36头牛，即处理组A组、B组和对照组C组，，试验A组（基础日粮＋200g益华乳酸菌素），试验B组（基础日粮＋100g益华乳酸菌素），对照C组（基础日粮），预饲期5天，正式期30天。

试验用益华乳酸菌素：由益华河北生物科技有限公司提供。本次试验用益华乳酸菌素为益华反刍专用乳酸菌素。

1.2日粮组成与饲养管理

试验期选择在7月21日至8月25日。试验前，三组泌乳牛均饲喂对照组的基础日粮至少2周。进入试验期后，对照组日粮不变，处理组饲喂添加了益华乳酸菌素的日粮。牛场参照 NRC（2001）奶牛饲养标准配制基础日粮，见表1与表2。

试验奶牛单槽饲喂, 每日分别于07: 00、14: 00和21: 30 饲喂3 次，自由采食, 自由饮水, 采用管道式挤奶机挤奶，时间为06: 00、13: 00 和21: 00。

表1 奶牛日粮配方及营养成分

表2 奶牛精料配方

注：每kg预混料含量：维生素A 800 kIU，维生素D₃ 600 kIU，维生素E 4 kIU，贴1200mg，铜1600 mg，锌800 mg，锰 3500 mg，碘120 mg，硒70 mg，钴80 mg等。

1.3样品采集与测定

1.3.1采食量的测定

正式期内每10天连续3天测定三组试验牛的群体采食量，计算个体平均采食量。

1.3.2饲料样品采集

正式期内每换一次饲料配方采集一次饲料样品，包括精料混合料、各种粗饲料以及剩料，每次采集的饲料样品烘干后粉碎过1mm标准筛，根据AOAC（1997）分析方法测定DM（105℃）、CP、EE、NDF、ADF和粗灰分含量。

1.3.3奶样的采集

预饲5天后采集奶样进行DHI测定。正式期每天记录奶牛产奶量。试验组和对照组的所有108头奶牛正式期的10、20、30天分别做DHI测定，测定成分包括体细胞数（SCC）、乳脂率、乳蛋白率、乳糖率、尿素氮。

1.3.4血样的采集

正式期10、20、30天时于晨饲前奶牛空腹，从每组中选择5头试验牛，进行尾静脉采血，每头牛采10mL，一份1%肝素抗凝，离心血浆，一份立即离心血清，-20℃冷冻保存。

测定指标包括

（1）抗氧化性能：超氧化物歧化酶（SOD）、谷肌甘肤过氧化物酶（GSH-Px）乳酸脱氢酶(LDH)和丙二醛(MDA)；

（2）能氮代谢和热应激：血浆尿素氮（BUN）、非酯化脂肪酸(EFA)、血清总蛋白(TP)和白蛋白、球蛋白、T3、T4。

1.3.5体况评分、粪便评分、体温的测定

正式期的10、20、30天，请三个经过培训的人员对所有奶牛进行一次体况评分，结果取平均值，5分制。

采用五分制，每周日对全群牛进行粪便评分，并拍照。

使用兽用温度计，在奶牛直肠停留3～5 min后取出，读数记录为直肠温度。

1.3.6环境温湿度测定

每天中午2点监测并记录环境高温度和相对湿度，并计算牛舍环境温湿指数(ambient temperature-humidity index，THI)。

2 数据处理

本试验数据采用SPSS软件的数据分析功能进行数据汇总和分析, 试验数据用平均值±标准误表示。

3 结果及分析

3.1牛舍温热环境

试验期牛舍温热环境数据见表3。由表3可知，无论是预饲期还是正式期，在各测定时间点奶牛牛舍的气温均在27.86℃以上。研究表明，一般奶牛最适宜的温度为12℃-14℃，怀孕奶牛与泌乳奶牛最适宜的温度为 16℃-20℃，当温度超过24℃时，奶牛就会发生热应激反应。温湿指数（Temperature and humidity index,THI）在69以上，荷斯坦奶牛即处于热应激状态，本试验中THI均在90以上，可见试验环境已对试验牛只构成了严重热应激，此时奶牛会出现奶牛体温升高，呼吸急促（气喘），分泌过多的唾液，奶牛显得不舒适。奶产量和繁殖力急剧降低，严重者牛可能死亡。

表3：试验期内牛舍温热环境

3.2 益华乳酸菌素对奶牛生理指标的影响

直肠温度是衡量热应激的直观指标。正常情况下，奶牛直肠温度相对稳定，一般为36-38℃。该值超过正常1℃甚至更低都会影响奶牛生产性能。奶牛处于热应激下，THI每升高1单位，直肠温度会升高0.12℃。由表4可知，试验奶牛均处于热应激环境中， B组直肠温度呈下降的趋势，由试验1-10天的38.86℃下降至38.52℃，下降了0.87%。试验21-30天时，B组直肠温度低，为38.52℃，A组高，为38.94℃，B组较A组降低了1.08%。

表4：益华乳酸菌素对奶牛直肠温度的影响

3.3益华乳酸菌素对奶牛采食量的影响

研究表明，奶牛采食量与热应激水平呈负相关关系，奶牛热应激会导致奶牛采食量下降，热应激水平越高奶牛采食量越受影响。本试验数据也有利的证明了这一点。从表5可以看出，奶牛采食量随着牛舍热应激水平的变化而变化。A、B组试验牛采食量均是先增加后降低然后又升高，而C组是先降低后上升。其中，A组试验牛采食量由试验前的40.92 kg/天·头上升到试验后期的42.28 kg/天·头，相对升高了3.32%，在试验16-21天时采食量达到高为45 kg/天·头。B组试验牛采食量试验前与试验后期变化不大，采食量在试验16-21天达到高达到46.79 kg/天·头。C组试验牛采食量由试验前的46.33 kg/天·头下降到试验后期的43.54 kg/天·头，相对减低了6.02%。

表5：益华乳酸菌素对奶牛采食量量（鲜重）的影响

3.4益华乳酸菌素对奶牛瘤胃健康状况的影响

根据美国密歇根州大学提出的粪便分值体系（Manure scoring system）对试验期试验牛粪便进行评分，见表6。通过表6可以看出，三组奶牛粪便评分均在3分，不存在差异性。粪便评分3分是高产牛群的正常值，说明试验各组牛只瘤胃健康，同时也证明了饲喂益华乳酸菌素对奶牛瘤胃健康没有影响。

表6：益华乳酸菌素对奶牛瘤胃健康的影响

3.5益华乳酸菌素对奶牛的体况的影响

奶牛体况评分就是对奶牛的膘情进行评定，它能反映该牛体内沉积脂肪的基本情况，一般而言，理想的泌乳牛体况评分应在2.5分~3.5分之间。由表7可知，B组在试验期内体况评分均在3.05分，而A组由试验前期的3.1分下降到了3.05分，C组由3.0分上升到了3.05分，但在试验后期A、B、C组试验牛体况评分均在3.05分，说明试验期各组奶牛均处于理想体况状态，益华乳酸菌素对奶牛的膘情没有影响。

表7：益华乳酸菌素对奶牛体况的影响

3.6 益华乳酸菌素奶牛日产奶量的影响

处于热应激环境中，奶牛受到影响的最直接反映就是产奶量的下降。由表8可知，A、B、C组奶牛平均产奶量呈逐渐下降的趋势。A、B、C组试验结束时平均日产奶量分别为31.08 kg、32.97 kg、31.24 kg，较试验前7天分别降低了10.45%、3.2%、9.92%，B组日产奶量下降相对较低。在试验21-31天，B组奶牛平均日产奶量较A、C组分别高6.08%和5.53%，可见，日粮添加100g益华乳酸菌素对缓解热应激条件下产奶量的下降效果明显。

表8：益华乳酸菌素对奶牛产奶量的影响

                                 kg/天

3.7 益华乳酸菌素对奶牛体细胞数的影响

体细胞（somatic cell counts，scc）指的是牛奶吞噬细胞、脱落上皮细胞、中性白细胞的总称。当乳腺被感染或受机械损伤后，体细胞就会上升，在某种程度上体细胞数是反应乳腺感染程度的标记。研究表明，高温和高湿条件下所引起的热应激会引起奶牛体细胞数的增加。本试验结果显示（表9）：益华乳酸菌素能够影响奶牛乳房的健康，降低体细胞数。在试验期内，A、B组奶牛平均体细胞数均呈先增加后下降的趋势，而C组却呈不断上升的趋势。其中， A、B、C组均在试验11-20天时平均体细胞数达到高，分别为13.08万/ml、12.01万/ml、22.59万/ml，A、B组较C组分别低42.10%、46.83%，B组较A组低8.18%。试验结束时，B组平均体细胞数低为7.99万/ml，较A、C组分别低32%、64.07%，可见日粮添加100g益华乳酸菌素对降低奶牛体细胞数的效果好。

表9：益华乳酸菌素对奶牛体细胞数的影响

3.8益华乳酸菌素对奶牛乳成分的影响

从表10可知，奶牛饲喂益华乳酸菌素显著影响其乳成分。试验期，奶牛平均乳脂率呈先升高后降低的趋势。在试验11-20天时，A组平均乳脂率达到高为3.98%，较试验前提高了18.45%；在1-10天时，B组平均乳脂率达到高为3.82%，较试验前提高了4.66%；在11-20天时，C组平均乳脂率达到高为4.23%，较试验前提高了12.5%， C组平均乳脂率较A、B组分别高6.28%（p<0.05）、13.71%（p>0.05），A、B组差异不显著；试验21-30天，A组平均乳脂率较试验前7天提高了5.95%、B、C组平均乳脂率较试验前7分别降低了3.56%、5.85%。试验1-10天，各组平均乳蛋白率差异显著，C组平均乳蛋白率高为3.39%，较A、B组分别高10.42%（P<0.01）、4.31%（p>0.05）；试验21-30天，A、B、C组分别较试验前7天分别提高了4.40%、8.28%、0.89%，可见益华乳酸菌素对提高乳脂率、乳蛋白率含量有一定的促进作用。

脂蛋白比合理的范围是1.12-1.3，脂蛋比过低说明日粮精粗比不合理、奶牛存在酸中毒的风险，若脂蛋比过高说明奶牛快速动用脂肪存在酮病的风险。本试验结果显示：饲喂复合益华乳酸菌素后，奶牛脂蛋比逐渐趋于合理范围，但试验21-30天，各组脂蛋比均又低于1.12，这可能与热应激环境中牧场奶牛日粮精粗比搭配不合理造成奶牛瘤胃酸中毒有关。试验期内，各组平均乳糖率在5.0%-5.3%范围内，从试验结果来看，饲喂益华乳酸菌素对奶牛乳糖率没有影响。

乳中尿素氮含量是评估奶牛日粮的有效手段之一，在美国荷斯坦牛的尿素氮平均值为12.8 mg/dl，我国一本认为应该介于10-18 mg/dl。本试验条件下，试验牛乳中平均尿素氮含量均呈逐渐升高的趋势，其中，A、B、C组平均尿素氮含量均在试验1-10天达到高，分别为17.64 mg/d、22.42 mg/dl、18.41 mg/dl，B组较A、C组分别高27.10%（p<0.01）、21.78%（p<0.01）；试验21-30天，A组平均尿素氮含量低为17.41 mg/dl，较B、C组分别低13.17%（p>0.05），3.43%（p<0.05），由于整个试验期内各组奶牛尿素氮含量均处于较高水平，这对牛只繁殖存在一定的影响，因此，建议牛场及时调整日粮配方。

表10：益华乳酸菌素对奶牛乳成分的影响

注：同行肩标不同者表示差异显著，小写字母不同表示差异显著（p<0.05），大写字母不同者表示差异极显著（p<0.01），下同。

3.9益华乳酸菌素对奶牛血液能氮代谢和热应激指标的影响

益华乳酸菌素对奶牛血液能氮代谢和热应激指标的影响见表11。

表11：益华乳酸菌素对奶牛血液能氮代谢和热应激指标的影响

有研究显示，热应激直接影响奶牛的能量代谢，使奶牛处于能量负平衡的状态，但血浆中游离脂肪酸水平并没有升高。由表11可知。试验21-30天，A组血清中FFA含量较试验1-10天最降低了5%， B组相对降低了52.94%，而C组相对提高了7.69%。可见，日粮添加益华乳酸菌素能够缓解热应激条件下奶牛能量负平衡状况。

本试验结果显示：日粮中添加益华乳酸菌素对奶牛血清中的TP、ALB、GLOB、UREA含量没有显著影响，但对T3、T4有一定的影响。甲状腺素对恒温动物调节体温起着重要作用，T3和T4能促进机体对糖的吸收和肝糖元的分解，促使各组织对糖的利用，使机体产热量增加。研究表明，热应激条件下奶牛血清T3、T4均明显下降，T3、T4的下降一方面会影响胃肠的蠕动，延长食糜的过瘤胃时间，降低采食量，另一方面会一直排乳反馈，导致产奶量的下降。本试验条件下，试验后A、B、C组T4水平较试验前均升高，而血清中T3水平是先升高后降低。其中各组血清中T3水平在试验11-20天达到高，分别为1.94 ng/ml、2.08 ng/ml、1.73 ng/ml，B组较A、C组分别高7.22%（p>0.05）、20.23%（p<0.01）；试验21-30天，A、B、C组T3水平较试验1-10天分别提高了18.47%、15.52%、11.11%。各组血清中T4水平在试验11-20天达到高，其中B组高为81.01 ng/ml，较A、C组分别高12.02%（p>0.05）、22.26%（p>0.05），A组较B组高9.15%（p>0.05），试验21-30天，A、B、C组T4水平较试验1-10天分别提高了18.87%、5.84%%、13.12%。可见，日粮添加200g益华乳酸菌素对奶牛调节体温、缓解热应激的效果好。

3.10益华乳酸菌素对奶牛抗氧化性能的影响

益华乳酸菌素对奶牛血液抗氧化性能指标的影响见表12。乳酸脱氢酶（LDH）是一种糖酵解酶，能够催化乳酸脱氢生成丙酮酸，该指标往往用于反映肝功能是否出现异常。由表12可知，各组LDH含量均呈逐渐升高的趋势，在试验21-30天时达到高，其中C组高为1412.40 U/L，较A、B组分别高30.01%（p>0.05）、27.84%（p>0.05）。谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px) 是机体内广泛存在的一种重要的过氧化物分解酶，它可以清除由活性氧和H₂O₂诱发的脂质过氧化物，保护细胞膜结构和功能的完整性，本试验中A、B组血清中GSH-px含量呈逐渐下降的趋势，但C组呈逐渐上升的趋势，在试验21-30天，C组血清中GSH-px含量达到68.00 U/L，比A、B组分别高9.68%（p>0.05），61.90%（p>0.05），B组比A组低32.26%（p>0.05）。

丙二醛（MDA）是多不饱和脂肪酸的最终氧化产物，MDA生成增多会导致组织蛋白和功能改变，超氧化物歧化酶（SOD）是广泛存在于机体内的一种金属酶，是机体的主要的抗氧化物质，有研究表明，当机体防御机能降低时，SOD会降低，MDA会明显升高。在本试验条件下，各组血清中SOD含量差异不显著，含量均在11-12 U/ML，A、B组血清中MDA含量呈逐渐降低的趋势，而C组呈逐渐升高的趋势，在试验21-30天，C组血清中MDA含量高为4.78nmol/ml，比A、B组分别高66.55%（p>0.05）、83.85%（p>0.05）。

3.11 经济效益分析

本试验期间，奶牛TMR饲喂成本为1.21元/kg·天·头，益华乳酸菌素为0.01元/g，乳企收购奶价为3.6元/kg，试验后各组奶牛养殖经济效益见表13。

表13：益华乳酸菌素对奶牛养殖经济效益的影响

由表13可知，试验期后B组每天牛盈利为正值，A组与C组均为负值，可见在本试验条件下，日粮添加100克益华乳酸菌素奶牛养殖经济效益好，达到每天每头牛盈利2.57元。

4、结论

4.1 奶牛日粮添加益华乳酸菌素能够降低奶牛直肠温度、提高采食量从而缓解奶牛热应激效应。在本试验中，日粮添加100克益华乳酸菌素，的B组奶牛直肠温度由试验1-10天的38.86℃下降至38.52℃，下降了0.87%。日粮添加200克益华乳酸菌素的A组试验牛采食量相比试验前升高了3.32%。

4.2本试验条件下，奶牛日粮添加益华乳酸菌素能够有效降低体细胞数、缓解热应激条件下奶牛产奶量的下降，从而提高日产奶量。本试验条件下，日粮添加100克益华乳酸菌素效果好。

4.3本试验条件下，添加益华乳酸菌素能够提高血清T3、T4水平含量，降低血清MDA水平含量，可见益华乳酸菌素对缓解奶牛热应激起到了积极的作用。

4.4本试验条件下，添加益华乳酸菌素能够提高奶牛养殖经济效益，其中以日粮添加100克益华乳酸菌素效果好，每天每头牛增加经济效益达2.57元。